Оценка биологического действия медицинских изделий по серии ГОСТ ISO 10993 — цитотоксичность in vitro, раздражающее и сенсибилизирующее действие, общетоксическое действие, гемосовместимость. Лекарственные средства — по ОФС ГФ РФ, косметика — по ТР ТС 009/2011. Программа подбирается под изделие с учётом категории контакта (A, B, C).
ГОСТ ISO 10993-5 задаёт пятибалльную шкалу оценки реакции клеток. Индекс больше 2 считается цитотоксическим эффектом и требует дополнительной оценки.
Токсикологическая оценка медицинского изделия — это системный процесс по серии ГОСТ ISO 10993. Программа подбирается на базе классификации из ISO 10993-1: по характеру контакта (поверхность тела / контакт с тканями / контакт с кровью) и по продолжительности контакта — категория A (до 24 ч), B (24 ч – 30 сут), C (свыше 30 сут).
Методы цитотоксичности объединяются в четыре категории: оценка повреждения клеток морфологически, измерение повреждения клеток, измерение клеточного роста и измерение специфических аспектов клеточного метаболизма. При выявлении цитотоксичности проводят дополнительную оценку: анализ зависимости ответа от концентрации, химическая характеристика вымываемых компонентов, анализ остаточных количеств стерилизующих агентов.
| Балл | Реакция клеток | Вывод |
|---|---|---|
| 0 Отсутствуетnone | 0 % лизиса | Не цитотокс. |
| 1 Незначительнаяslight | ≤ 20 % лизиса | Не цитотокс. |
| 2 Умереннаяmild | ≤ 50 % лизиса | Погран. |
| 3 Значительнаяmoderate | ≤ 70 % лизиса | Цитотокс. |
| 4 Выраженнаяsevere | > 70 % лизиса | Цитотокс. |
Серия включает более 20 частей — применимые выбираются по виду и длительности контакта изделия с организмом человека.
Основной документ — ГОСТ ISO 10993-1, который задаёт принципы оценки биологического действия в рамках менеджмента риска и содержит таблицу применимости методов по категориям контакта. На этой матрице строится программа конкретного проекта.
Наиболее часто применяемые части: 10993-5 (цитотоксичность in vitro), 10993-10 (раздражение и сенсибилизация), 10993-11 (общетоксическое действие), 10993-4 (изделия в контакте с кровью). Для изделий с длительным контактом дополнительно применимы части 3, 6, 13.
Лекарственные средства оцениваются по общим фармакопейным статьям ОФС ГФ РФ: «Аномальная токсичность», «Пирогенность», «Бактериальные эндотоксины». Косметика — по токсикологическим показателям ТР ТС 009/2011.
Отдел оснащён для методов in vitro на клеточных культурах и для приготовления экстрактов по ГОСТ ISO 10993-12.
Биологический отдел ИЛЦ «НЛТ» выполняет исследования по основным частям серии ГОСТ ISO 10993. Для методов in vitro применяются клеточные линии L929 (фибробласты), 3T3, MRC-5 и российская методика на суспензионной кратковременной культуре подвижных клеток.
Условия экстракции — 37 °C (для изделий в контакте с тканями), 50 °C (ускоренный режим), 70 °C (исчерпывающая экстракция). Соотношения площадь поверхности / объём экстрагента — по табл. 1 ГОСТ ISO 10993-12.
От классификации изделия по категории контакта до оценки результатов по шкале 0–4. Для изделий постоянного контакта может потребоваться комбинация методов in vitro и in vivo.
По ГОСТ ISO 10993-1 определяется вид контакта (поверхность / ткани / кровь) и длительность: A (≤24 ч), B (24 ч – 30 сут), C (>30 сут). Выбор минимально достаточной программы.
Для каждого вида испытаний фиксируются методика, контроли и контрольные материалы. Программа согласуется с заказчиком и закрепляется договором.
По ГОСТ ISO 10993-12 — полярные и неполярные растворители, контролируемая температура и время. Параллельно ведутся положительный и отрицательный контроли.
Клеточные культуры млекопитающих инкубируются с экстрактом (или при прямом / опосредованном контакте). 37 °C, 5 % CO₂, до логарифмической фазы роста.
Морфологически и количественно (MTT, Neutral Red, LDH). Присвоение балла 0–4 по шкале ISO 10993-5. При индексе >2 — расширенное исследование.
Оформляется по ГОСТ ISO/IEC 17025: методика, контроли, результаты, вывод. Пригоден как часть оценки биологического действия в досье Росздравнадзора.
Срок зависит от применимых частей серии ISO 10993 и типа испытаний: in vitro — короче, in vivo — длиннее. Стоимость складывается из числа методик и количества образцов.
Категория контакта по ISO 10993-1: A (до 24 ч) — обычно достаточно цитотоксичности и раздражения; B (24 ч – 30 сут) — добавляется сенсибилизация и субхроническая токсичность; C (свыше 30 сут) — дополнительно генотоксичность, канцерогенность, иммунотоксичность. Для изделий в контакте с кровью — часть 10993-4.
Правильная классификация изделия с первого раза исключает лишние испытания. При наличии данных о биосовместимости аналогичных МИ или химической характеристике материалов часть методик может быть заменена обоснованием эквивалентности — это закреплено в ISO 10993-1.
Приложите описание изделия, материалы и сведения о характере и длительности контакта с организмом. Специалист определит применимые части серии ISO 10993 и рассчитает программу.